∵|a|=5,|b|=3, ∴a=±5,b=±3; ∵ab<0, ∴ab异号. ∴当a=5,b=-3时,a-b=5-(-3)=8; 当a=-5,b=3时,a-b=-5-3=-8. 故a-b的值为8或-8.