双向电泳第二步SDS-PAGE跑胶的问题

主要有2个问题：第一：跑出来的胶有很多的横着竖着的条带，不知道是蛋白没有分开还是怎么的。看Bio-Rad上面写的问题分析说可能是蛋白被污染了，所以加了DNAse I和RNase A在最开始的蛋白里面，不过效果还是不好，依然有很多条带。第二：把第一条strip放在成品胶（SDS-PAGE的那个胶）顶部，用琼脂（agarose）凝固了2个小时，然后再跑SDS-PAGE。跑前这块成品胶都好好的，但是跑完胶（2个小时）以后，成品胶就连同上面的strip一起被挤出了原来的槽子。有朋友说可能是跑胶的时候温度太高，让胶胀大了。我就把胶放在4度的冷冻室里面跑，但是成品胶还是被挤出来了，这样会影响从strip里面转到成品胶的蛋白量。求好心人帮忙解答一下！

2026年09月25日 23:50

有1个网友回答

网友（1）：

1，提取蛋白的时候要充分超声粉碎，然后高速离心。吸取上清的时候不要触到沉淀。污染不一定是RNA和DNA，还有可能是胶里面有杂质。

2. 遇热膨胀过度，你可以在电泳槽里面安放冰槽，电泳液预先降温，同时降低电泳时的电流。还有配琼脂也要用缓冲液，而不是水，不然不导电。接触不好也会引起条带变形