根据你的反转录引物而定。①如果是普遍反转录引物,则不需要,也就是反转录用一种引物将RNA全部反转成cDNA然后定量的时候再使用miRNA和对应的普通基因各自的定量引物。②若使用的是特异性反转录引物则需要分开反转录,前面的buffer、酶等能混合,最后要分开,加入各自对应的反转录引物。无论是普遍反转录还是特异性反转录,均可进行后续的定量。貌似特异性引物更精确。