如何浓缩细胞培养液中可能存在的分泌蛋白
有二种可能性:
1.你的细胞裂解和抽提过程可能出了问题,你的蛋白是分泌蛋白,所以在信号肽被切掉前(蛋白分泌出细胞前)是嵌入在膜上,如果你使用的抽提液不够强的话,胞内蛋白可能没有溶出,而是在细胞碎片上,没有加入到WB膜上. 你的阳性对照可能本来是个胞内蛋白,所以没有问题,建议选用一个膜蛋白或其他分泌蛋白作为阳性对照.
2.还有一种可能就是你的蛋白在细胞内的浓度太低,而你的抗体检测灵敏度不高.
第一种可能性要大.
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