基因工程操作步骤中,需要从受体细胞群中筛选出已获得目的基因的细胞,图1中①-③示一种筛选方法的过程.

2026年08月28日 07:38
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(1)①过程为构建基因表达载体,需要对质粒进行切割和与目的基因相连接,所以要用限制酶和DNA连接酶;
(2)①为构建基因表达载体,会出现将目的基因与质粒成功重组和重组失败的结果,所以ρBR322会出现两种结果,重组质粒和未重组的质粒;
(3)细菌有三类:含有质粒(不是重组的)、含有重组质粒的、不含有质粒的.Tet抗性基因上有目的基因的插入位点,所以重组质粒上没有Tet抗性基因,成功导入重组质粒的细菌和没有导入的细菌均不含Tet抗性基因,即都不抗四环素,细胞可以在含四环素培养基上存活但不生长,而环丝氨酸会使生长的细胞致死,对不生长的细胞无影响,但会使含有抗四环素的细菌致死,所以C中成活的细菌有导入不成功的细菌和导入重组质粒的细菌.
(4)经过C后,现需要含重组质粒的细菌,含重组质粒的细菌含有Amp抗性基因,可在氨卡青霉素培养基中生长,而导入不成功的细菌会在其中死亡,所以可将经过C存活的细菌转入含氨卡青霉素的培养基中培养.
(5)根据图中切割位点T和G及结果知所识别的序列应为
(6)用XbaⅠ和BclⅠ既不破坏目的基因又可将其完整切下,而获取目的基因和重组质粒所用限制酶应保持一致
故答案为:
(1)限制酶和DNA连接酶;
(2)重组质粒和未重组质粒;
(3)含有重组质粒的细菌和导入不成功的细菌;
(4)将存活的细菌转入含氨卡青霉素的培养基中培养;
(5)
(6)XbaⅠ和BclⅠXbaⅠ和BclⅠ