A、频繁使用的菌种,可用斜面培养基保藏在4℃的冰箱中,A正确; B、临时保藏菌种的培养基需要3~6个月定期更换一次,B错误; C、长期保藏的菌种,需要降低代谢和变异发生概率,C正确; D、长期保藏菌种时,可各取lmL灭菌甘油和培养菌液混合后保存在冷冻箱中,D正确. 故选:B.