血清和静脉全血提取基因组DNA有什么不同

没有静脉全血,提取基因组DNA可以用血清吗?...
2026年09月22日 19:03
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1,取列车到含有质粒pBS中250毫升细菌培养基的晚期对数生长期,下5000克离心4℃左右有15分钟,弃去上清,将离心管倒置所有上清液流下。 - 第2,将细菌沉淀重悬浮于冰冷的STE 50毫升(这个步骤可以省略)。
页3,用离心步骤,收集细菌细胞。
页4,将细菌沉淀5毫升溶液I,再悬浮细菌细胞的充分悬浮。

5,加12毫升新鲜制备的溶液II,盖紧瓶盖,缓缓倒转试管几次以充分混合内容物,在冰浴中10分钟。

6,加入到9毫升的冰冷溶液III,振摇试管几次以混合内容物,在冰上放置15分钟,然后将白色絮状沉淀应构成。

在5000克离心7,4℃左右15分钟。

8,取上清液,加入50ml的RNA酶A(10毫克/毫升),37℃左右的水浴20分钟。

如图9所示,通过加入等体积的饱和酚/氯仿,涡旋混合,在12000克4℃左右离心10分钟。

10,取上层水相,加入氯仿,涡旋混合,4等体积℃左右离心12000克10分钟。

11,取上层水相加入为4mol的五分之一体积/ L的NaCl和10%的PEG(分子量6000),在冰上放置60分钟。离心12000克

12.4℃左右15分钟沉淀了几毫升70%的冰冷乙醇洗涤,离心12000克4℃左右5分钟。

13,抽真空沉淀,溶解500毫升TE或水。

【注意事项】1,提取过程中应保持在较低水平。

2加入溶液II和III的操作解决方案,可以按比例混合后,避免剧烈摇晃。

3往往由于RNA酶的DNA酶的存在下,利用RNA酶的耐热特性,酶溶液应被用于执行热处理(80℃左右1小时) DNA的酶失活。