为什么不同梯度稀释的蛋白质溶液测出来的最终浓度不一样

2026年09月23日 10:38
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用标准的结晶牛血清清蛋白(BSA)或标准酪蛋白,配制成10mg/ml的标准蛋白溶液,可用BSA浓度1mg/ml的A280为0.66来校正其纯度。如有需要,标准蛋白质还可预先用微量凯氏定氮法测定蛋白氮含量,计算出其纯度,再根据其纯度,称量配制成标准蛋白质溶液。
理论上从高到低简单,因为高浓度稀释只需要加水,(如果低浓度变高浓度还要重新称量药品),但实际实验过程中由低到高调节浓度梯度更方便;
1体积 100% A液 要配成50%需加1体积水,25%需再加2体积水依此类推,体积不断增大,实验室一般不用;
由低到高时不换枪头,先配置标准浓度基液,不断在原液中加基液就可以连续调节,如1% 2% 3%等,如果是10% 20% 50% 会出现体积误差,需重新调配给液浓度,粗略体积比要大于1:50(体积相差越大越好以减小误差),既节约材料,又方便连续实验,但实验前要精密的计算药品用量.