微生物在甘油中生长和代谢受到抑制的原理从而达到保藏目的。而且,甘油管冷冻保藏法适用于一般细菌的保存,同时也适用于链球菌、弧菌、真菌等需特殊方法保存的菌种,适用范围广,操作简便,效果好,无变异现象发生。
甘油-生理盐水保存液保存菌种优于甘油原液,其原因是加入生理盐水适当降低了甘油的高渗作用,且有肉汤培养物适量增加保存液的营养成分,从而更好地保护了待保存的菌株。
甘油管冷冻保藏法的具体步骤(供参考):
1、配制30%甘油(100%甘油:无菌水=3:7),高压灭菌后备用。
2、取lEP管一只,用接种环无菌刮取菌落若干,涮洗在盛有PBS的EP管中(也可用PBS洗涤培养基上的菌落制成悬液,再吸取悬液置于EP管中)。
3、在盛有菌悬液的EP管中加等量30%甘油。
4、封盖好,作好标记,置于-70℃冻存。也可以用生理盐水取代PBS。