病毒名称:小麦黄矮病毒-PAV、MAV,Barley yellow dwarf viruses(BYDV-PAV,MAV);小麦黄矮病毒-GPV、RMV、SGV,Barley yellow dwarf viruses(BYDV-GPV、RMV、SGV)。禾谷黄矮病毒-RPV,Cereal yellow dwarf virus(CYDV-RPV)。
分类地位:分别为黄症病毒属Luteovirus(BYDV-PAV,MAV)、未定属(BYDV-GPV、RMV、SGV)和马铃薯卷叶病毒属Polerovirus(CYDV-RPV),均属黄症病毒科Luteoviridae。在国际病毒分类委员会(ICTV)中的编码为00.039.0.01.002(MAV),00.039.0.01.001(PAV)。
病毒的提纯:小麦黄矮病毒在病株内的含量较低,提纯比较困难,采取下列两种方法可取得较好效果。
①酶法提纯:冰冻病株加0.02mol/L柠檬酸缓冲液(pH6),匀浆后加崩溃酶(Driselase),振荡4h,榨汁低速离心去渣,滤液经氯仿和正戊醇处理及PEG沉淀,差速离心后加1%Triton*100,于20%蔗糖垫超速离心制得部分提纯制剂,再进一步用蔗糖密度梯度离心和氯化铯梯度离心,即可制得提纯病毒。
②冰冻提纯法:取在零下20℃冷冻储藏的病叶,加0.5mol/L磷酸缓冲液(内含0.1mol/L巯基乙酸和0.05mol/LEDTA-2Na)绞碎榨汁,滤渣再于零下20℃冷冻匀浆,重复两次,将滤液合并后进行氯仿、正丁醇处理。PEG沉淀和磷酸缓冲液回溶,低速离心去渣,反复抽提三次,将三次上清合并进行PEG沉淀和差速离心,取得部分提纯制剂。最后再经Sephadex-G200凝胶过滤进行纯化。提纯制剂的A260/A280为1.79。
病毒理化特性:
①病毒粒子:为对称球形病毒,外壳为二十面体(T=3),无包膜;电镜观察投影粒体直径30nm,组织切片中约24nm。
②核酸:单链RNA,分子质量1.95*106u。单分体基因组,GAV、MAV、PAV基因组分别有6个阅读框,GPV基因组有5个阅读框。
③蛋白:外壳蛋白分子质量22.5ku。
株系:1964年W.F.Rochow发现不同种的蚜虫传播大麦黄矮病毒的能力差别很大。他提出利用不同种的麦蚜传播病毒能力来区分大麦黄矮病毒分离物。根据生物学、血清学试验,把美国大麦黄矮病毒分为五种病毒分离物,即由禾谷缢管蚜专化性传播的禾谷缢管蚜专化性分离物(RPV),麦长管蚜专化性传播的麦长管蚜专化性分离物(MAV),禾谷缢管蚜和麦长管蚜都能传播的非专化性分离物(PAV),玉米蚜专化性传播的玉米蚜专化性分离物(RMV)和麦二叉蚜专化性传播的麦二叉蚜专化性分离物(SGV)。MAV、PAV和SGV分离物之间血清学相关,RPV和RMV分离物之间血清学相关,但两组之间血清学不相关。
我国麦蚜传播大麦黄矮病毒的能力也有明显的差异,而这种差异在地区和年度之间有变化。在同一地区内,某些年份以麦二叉蚜传毒能力最强,某些年份以麦长管蚜传毒能力最强。在同一年份里,有的地区以麦二叉蚜传毒能力最强,有的地区以麦长管蚜传毒能力最强。如1973年陕西、甘肃、河南等地测定,均以麦二叉蚜传毒能力最强,而1974—1975年,则以麦长管蚜传毒能力最强。但在病害流行年份,优势传毒媒介多为麦二叉蚜。根据4种蚜虫在同一病株标样上饲毒后传毒能力的差异,结合酶联免疫吸附试验,已鉴定出我国大麦黄矮病毒主要株系类型:
①麦二叉蚜、禾缢管蚜株系(GPV):麦二叉蚜及禾缢管蚜对本株系的传毒力非常稳定,但麦长管蚜及玉米蚜均不能传毒。与美国的五个株系及英国的两个株系均无血清关系,是中国特有的株系。麦二叉蚜对此株系带毒率高,传毒力强,且带毒有翅蚜可由冬麦区远距离迁飞春麦区。因此,这一株系是中国的主要株系。主要分布在西北、华北的旱源麦区。
②麦二叉蚜、麦长管蚜株系(GAV):麦二叉蚜及麦长管蚜非专化性传播,但禾缢管蚜及玉米蚜不能传毒,与美国的麦长管蚜株系(MAV)及麦二叉蚜株系(SGV)具有强阳性血清反应,与PAV反应较弱,与RPV及RMV株系均为阴性。主要分布在河南,山西,陕西,甘肃,内蒙古等地。
③禾缢管蚜、麦长管蚜、麦二叉蚜株系(PAV):禾缢管蚜、麦长管蚜传毒能力很强,麦二叉蚜较差,与美国的PAV株系及英国的PAV株系的多克隆、单克隆抗体强相关。主要分布在冬麦区的水浇地小麦种植区。