10uM浓度的引物，加个1ul足矣。在PCR反应中，经过n次循环，理论上DNA链的数目扩增了2的n次方。PCR的一个循环，一个DNA模板被复制为2个DNA片段。
PCR循环次数通常就是30左右。循环数太多了，虽然在一定程度上能够提高产物量，但是由于反应时间过长。
有一些非特异产物的扩增也会相应增加；而且随着酶的扩增能力下降,合成目标片段的能力也会随之下降,也可能引起其他的非特异性扩增。
扩展资料：
PCR反应五要素：参加PCR反应的物质主要有五种即：引物(PCR引物为DNA片段，细胞内DNA复制的引物为一段RNA链）、酶、dNTP、模板和缓冲液（其中需要Mg2+）。
引物有多种设计方法，由PCR在实验中的目的决定，但基本原则相同。PCR所用的酶主要有两种来源：Taq和Pfu，分别来自两种不同的噬热菌。其中Taq扩增效率高但易发生错配。Pfu扩增效率弱但有纠错功能。所以实际使用时根据需要必须做不同的选择。
模板即扩增用的DNA，可以是任何来源，但有两个原则，第一纯度必须较高，第二浓度不能太高以免抑制。
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